La cytométrie en flux est une technique de diagnostic et de recherche connue depuis de nombreuses années et largement utilisée en oncologie. La cytométrie en flux permet aux cellules qui composent la suspension dans un flux liquide laminaire ou stratifié d'être examinées avec un dispositif appelé cytomètre en flux. Quelles sont les indications de la cytométrie en flux et comment se fait-elle?
La cytométrie en flux est utilisée dans le diagnostic des néoplasmes hématologiques car ce sont des tumeurs liquides, mais ce n'est qu'une méthode auxiliaire. Cependant, il convient de rappeler qu'il existe un cancer qui ne peut être diagnostiqué qu'avec cette méthode. Il s'agit de la leucémie lymphoïde chronique.
Dans d'autres maladies néoplasiques, la cytométrie en flux est utilisée comme aide au diagnostic car elle montre des caractéristiques très importantes des cellules néoplasiques. Cette méthode est également utilisée pour évaluer l'efficacité du traitement appliqué.
Cytométrie en flux - que montre-t-elle?
Le courant liquide contenant les particules de test est passé à une vitesse constante (100-2000 particules par seconde) à travers la zone de mesure du cytomètre. Ici, les méthodes optiques analysent les formes, les dimensions, la structure interne des cellules et leur contenu, par exemple l'ADN. Toutes les cellules sont marquées optiquement.
Les mesures sont basées sur les propriétés de diffusion de la lumière laser par les cellules individuelles ou leurs composants (noyaux, chromosomes, mitochondries) ou la fluorescence induite par celles-ci.
Les signaux optiques sont convertis en signaux électriques qui, après analyse, sont présentés graphiquement sous forme de distributions mono- ou biparamétriques.
Le cytomètre permet également la ségrégation des particules après la sortie de la zone de mesure. On peut dire que l'appareil dispose (sépare) les cellules avec les mêmes éléments constitutifs (tri préparatif) ou extrait des types spécifiques de cellules (tri analytique).
La cytométrie en flux permet l'étude des caractéristiques de la population des cellules, l'analyse des composants cellulaires (notamment tels que les acides nucléiques, les protéines, les antigènes de surface et cellulaires), l'activité enzymatique, le potentiel membranaire, l'activité mitochondriale, le pH intracellulaire, le transport ionique et la fluidité membranaire.
Cytométrie en flux - application
La cytométrie en flux utilisée dans le diagnostic permet de déterminer le phénotype des cellules néoplasiques et l'expression de protéines individuelles. Pour y parvenir, on utilise des anticorps fluorescents marqués qui se lient de manière caractéristique aux antigènes à la surface de la membrane cellulaire. Grâce à cela, il est possible de déterminer le degré de leur différenciation, leur origine, leurs marqueurs pronostiques et thérapeutiques, ce qui facilite la décision sur d'autres procédures diagnostiques et thérapeutiques.
Une autre application de la cytométrie en flux consiste à surveiller l'efficacité du traitement appliqué en évaluant ce que l'on appelle «maladie résiduelle», qui est la proportion de cellules avec des phénotypes de type tumoral qui restent après le traitement.
La cytométrie en flux facilite également la recherche sur les maladies cancéreuses. Grâce à cette méthode, il est possible de rechercher par exemple des récepteurs qui sont situés à la surface des cellules néoplasiques et peuvent devenir des cibles de traitement.
La méthode permet d'évaluer l'activité des protéines à l'intérieur de la cellule. Il est également possible d'évaluer le cycle cellulaire, par exemple en déterminant la quantité d'ADN dans la cellule.
Au cours du processus de prolifération, une cellule traverse le cycle cellulaire par des phases où elle double la quantité d'ADN. En évaluant cette quantité, il est possible d'indiquer dans quelle phase se trouvent les cellules, si elles prolifèrent ou non, ou si elles entrent en apoptose. En d'autres termes, à l'aide de la cytométrie en flux, vous pouvez savoir si les cellules se préparent à l'apoptose, le processus de mort programmée.
Cytométrie en flux - l'avenir
La cytométrie en flux est connue et utilisée en médecine depuis plusieurs décennies. Cependant, il est constamment amélioré et crée de nouvelles possibilités de diagnostic et de recherche. Dans la première période d'utilisation de cette méthode, il était seulement possible de déterminer la taille et le degré de granularité des cellules.
L'utilisation de la lumière laser dans les appareils de cytométrie en flux vous permet d'exciter certains marqueurs fluorescents, puis d'évaluer leur émission. Les cytomètres modernes permettent une augmentation significative du nombre de marqueurs évalués en même temps, ce qui se traduit définitivement par une augmentation de la sensibilité de cette méthode.
C'est pourquoi il est utilisé non seulement dans le diagnostic des maladies néoplasiques, mais également pour évaluer l'efficacité du traitement.
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